動物基因工程

前言
概述
一、基因工程
二、基因工程的發(fā)展歷程
三、基因工程研究現(xiàn)狀及發(fā)展趨勢
上篇 動物基因工程的分子生物學基礎(chǔ)
第一章 動物基因的結(jié)構(gòu)與組合
第一節(jié) 動物基因的分子結(jié)構(gòu)
一、DNA的堿基組成
二、DNA的一級結(jié)構(gòu)
三、DNA的二級結(jié)構(gòu)
四、染色體
第二節(jié) 動物基因的重復(fù)序列
一、動物基因的重復(fù)序列
二、動物DNA重復(fù)序列的組織形式
第三節(jié) 動物基因的組織形式
一、動物基因的不連續(xù)性
二、基因家族和基因簇
三、串聯(lián)重復(fù)基因
四、側(cè)翼序列
第四節(jié) 基因及基因組的大小
一、動物基因的大小
二、動物基因組的大小
第五節(jié) 線粒體基因組
第二章 DNA復(fù)制
第一節(jié) DNA復(fù)制機制
一、半保留復(fù)制
二、方式和滾環(huán)方式
第二節(jié) DNA的復(fù)制過程
一、復(fù)制的起始和方向
二、DNA雙螺旋的解開
三、RNA引物的合成
四、半不連續(xù)復(fù)制
五、引發(fā)和引發(fā)體
六、鏈的延伸
七、鏈的終止
八、復(fù)制的忠實性
第三節(jié) 動物染色體DNA復(fù)制
一、動物DNA復(fù)制起始點與起始
二、延伸
三、復(fù)制終止
四、端粒的復(fù)制
第三章 動物基因的轉(zhuǎn)錄及轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控
第一節(jié) 轉(zhuǎn)錄的機制
一、轉(zhuǎn)錄起始
二、轉(zhuǎn)錄的延伸
三、轉(zhuǎn)錄終止
第二節(jié) 基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的后加工
一、rRNA的轉(zhuǎn)錄后加工
二、tRNA的轉(zhuǎn)錄后加工
三、mRNA的轉(zhuǎn)錄與后加工
第三節(jié) 真核基因轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控
一、基因結(jié)構(gòu)的活化
二、轉(zhuǎn)錄起始的調(diào)控
三、轉(zhuǎn)錄過程的調(diào)控
第四章 蛋白質(zhì)的生物合成及翻譯水平的調(diào)控
第一節(jié) 遺傳密碼
第二節(jié) tRNA及其功能
第三節(jié) 核糖體的結(jié)構(gòu)和裝配
第四節(jié) 真核生物蛋白質(zhì)的合成
一、原核生物蛋白質(zhì)生物合成機制
二、真核生物蛋白質(zhì)的生物合成
第五節(jié) 蛋白質(zhì)翻譯初始產(chǎn)物的修飾：
第六節(jié) 翻譯水平的調(diào)控
一、翻譯因子磷酸化調(diào)控
二、轉(zhuǎn)鐵蛋白mRNA翻譯的調(diào)控模式
下篇 動物基因工程操作
第五章 基因工程中的常用技術(shù)
第一節(jié) 凝膠電泳技術(shù)
一、凝膠電泳的基本原理
二、瓊脂糖凝膠電泳
三、聚丙烯酰胺凝膠電泳
第二節(jié) 核酸分子雜交技術(shù)
一、放射性同位素標記的DNA探針的制備
二、待測核酸的處理
三、雜交及雜交后漂洗
四、自顯影
第三節(jié) 細菌轉(zhuǎn)化
第四節(jié) DNA核苷酸序列分析技術(shù)
一、sanger雙脫氧鏈終止法
二、Maxam-GilbenDNA化學降解法
第五節(jié) PCR擴增技術(shù)
一、基本原理
二、PCR的設(shè)計和參數(shù)
三、PCR技術(shù)的應(yīng)用
第六章 基因工程常用的酶類
第一節(jié) 限制性核酸內(nèi)切酶和DNA分子的體外切割
一、Ⅱ類限制性內(nèi)切酶的基本特點
二、限制性內(nèi)切酶的來源及命名
三、影響限制性內(nèi)切酶活性的因素
四、限制性內(nèi)切酶酶切圖譜分析
第二節(jié) DNA連接酶與DNA分子的體外連接
一、DNA連接酶
二、DNA的連接方法
第三節(jié) DNA聚合酶及其在基因工程中的應(yīng)用
一、大腸桿菌DNA聚合酶I(全酶)
二、大腸桿菌DNA聚合酶I大片段(Klenow片段)
三、T4噬菌體DNA聚合酶
四、T7噬菌體DNA聚合酶
五、經(jīng)修飾的T7噬菌體DNA聚合酶(測序酶)
六、TaqDNA聚合酶及AmpliTaqTMDNA聚合酶
七、反轉(zhuǎn)錄酶(依賴于RNA的DNA聚合酶)
八、末端轉(zhuǎn)移酶(末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶)
第四節(jié) 核酸外切酶及核酸內(nèi)切酶
一、核酸外切酶
二、核酸內(nèi)切酶
第五節(jié) 其他DNA和RNA的修飾酶及其應(yīng)用
第七章 基因工程的載體和宿主表達系統(tǒng)
第一節(jié) 細菌質(zhì)粒載體
一、質(zhì)粒的基本特性
二、不同用途的細菌質(zhì)粒載體
第二節(jié) 噬菌體載體
一、入噬菌體
二、M13噬菌體
第三節(jié) 酵母系統(tǒng)載體
一、酵母整合質(zhì)粒
二、酵母復(fù)制子質(zhì)粒
三、酵母游離基因載體
第四節(jié) 動物病毒載體
一、病毒顆粒載體
二、病毒DNA混合型載體
第五節(jié) 原核細胞表達系統(tǒng)
一、影響真核基因在大腸桿菌中表達的主要因素
二、外源基因在大腸桿菌細胞內(nèi)表達重組蛋白
三、重組蛋白分泌到周質(zhì)
四、重組蛋白分泌到胞外培養(yǎng)基中
第六節(jié) 真核細胞表達系統(tǒng)
一、酵母表達系統(tǒng)
二、哺乳動物細胞表達系統(tǒng)
第七節(jié) 個體表達系統(tǒng)
第八章 基因工程的基本操作程序
第一節(jié) 基因工程的基本程序
第二節(jié) DNA體外重組和擴增
一、目的基因的制備和載體基因的選擇與改造
二、目的DNA片段與載體DNA體外重組
三、重組子的擴增
第三節(jié) 重組DNA分子的選擇與鑒定
一、抗性選擇
二、從轉(zhuǎn)化菌落快速提取質(zhì)粒鑒定大小選擇重組質(zhì)粒
三、快速提取質(zhì)粒進行酶切鑒定
……
第九章 轉(zhuǎn)基因動物
第十章 動物細胞工程
第十一章 動物基因治療與基因免疫
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主要參考文獻