轉(zhuǎn)基因動物技術(shù)

第一章 概述
第一節(jié) 轉(zhuǎn)基因動物技術(shù)的基本原理
一、轉(zhuǎn)基因的細(xì)胞學(xué)原理
二、轉(zhuǎn)基因的胚胎學(xué)原理
三、轉(zhuǎn)基因的分子生物學(xué)原理
第二節(jié) 轉(zhuǎn)基因動物技術(shù)要點
一、轉(zhuǎn)基因方法
二、轉(zhuǎn)基因的類型與在個體中的作用
三、轉(zhuǎn)基因動物制備方法
四、轉(zhuǎn)基因的表達(dá)特征及提高轉(zhuǎn)基因表達(dá)的策略
第三節(jié) 轉(zhuǎn)基因動物技術(shù)的應(yīng)用
一、應(yīng)用
二、問題及對策
參考文獻(xiàn)
第二章 實驗動物的飼養(yǎng)與培育
第一節(jié) 實驗動物的分類
一、在動物學(xué)上的分類
二、按遺傳學(xué)控制原理分類
三、按微生物學(xué)控制原理分類
第二節(jié) 實驗動物的飼養(yǎng)條件與環(huán)境控制
一、影響實驗動物環(huán)境的因素及其控制
二、實驗動物的房舍設(shè)施
三、實驗動物飼養(yǎng)的輔助設(shè)施和設(shè)備
四、實驗動物環(huán)境監(jiān)測和設(shè)施的維護(hù)
第三節(jié) 實驗動物的營養(yǎng)與飼料
一、動物營養(yǎng)需要
二、各種實驗動物的營養(yǎng)需要
三、飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)與飼料標(biāo)準(zhǔn)
四、飼料的營養(yǎng)成分及其作用
第四節(jié) 實驗動物的育種
一、近交系的培育
二、封閉群的培育
三、雜交群的培育
四、特殊性狀動物的培育
五、野生動物的實驗動物化
參考文獻(xiàn)
第三章 基因表達(dá)的調(diào)控
第一節(jié) 染色體的結(jié)構(gòu)
一、原核生物染色體的基本結(jié)構(gòu)
二、真核生物染色質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)
三、真核生物染色體的結(jié)構(gòu)模型
第二節(jié) 原核生物基因表達(dá)的調(diào)控
一、原核生物DNA水平的調(diào)控
二、原核生物的操縱子調(diào)控
三、原核生物翻譯水平的調(diào)控
四、原核生物基因表達(dá)的時序調(diào)控
五、環(huán)境條件對原核生物基因表達(dá)的調(diào)控
第三節(jié) 真核生物基因表達(dá)的調(diào)控
一、真核生物DNA水平的基因表達(dá)調(diào)控
二、真核生物轉(zhuǎn)錄水平的基因表達(dá)調(diào)控
三、真核生物轉(zhuǎn)錄后水平的基因表達(dá)調(diào)控
四、真核生物翻譯水平的基因表達(dá)調(diào)控
五、真核生物翻譯后水平的基因表達(dá)調(diào)控
參考文獻(xiàn)
第四章 轉(zhuǎn)基因的制備及導(dǎo)入宿主動物
第一節(jié) 目的基因的獲取
一、目的基因的來源
二、目的基因的分離
第二節(jié) 常用載體
一、質(zhì)粒（plasmid）
二、噬菌體載體（bacteriophage vector）
三、柯斯質(zhì)粒（cosmid）
四、人工染色體
五、動物病毒載體
六、染色體定位整合載體
七、幾種特殊的表達(dá)載體
第三節(jié) DNA重組
一、工具酶
二、目的基因DNA片段與載體的連接方法
三、重組DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞
四、重組體的選擇和篩選
第四節(jié) 外源基因?qū)胨拗鲃游锛?xì)胞的方法
一、磷酸鈣轉(zhuǎn)染技術(shù)
二、二乙氨乙基葡聚糖轉(zhuǎn)染技術(shù)
三、聚陽離子-DMSO轉(zhuǎn)染技術(shù)
四、顯微注射技術(shù)
五、電穿孔法
六、脂質(zhì)體栽體法
七、反轉(zhuǎn)錄病毒載體法
八、胚胎干細(xì)胞法
九、精子載體法
參考文獻(xiàn)
第五章 基因的定位打靶及條件打靶
第一節(jié) 基因打靶的載體和策略
一、基因打靶的載體
二、基因打靶的策略
第二節(jié) 基因的定位打靶
一、定位打靶載體的構(gòu)建
二、胚胎干細(xì)胞的培養(yǎng)和電轉(zhuǎn)
三、陽性ES細(xì)胞克隆的篩選
四、陽性ES細(xì)胞轉(zhuǎn)入胚胎
五、嵌合體小鼠的鑒定和維持
六、影響中靶效率的因素
第三節(jié) 基因的條件打靶
一、條件性基因打靶的概念和原理
二、表達(dá)各種可控的重組酶轉(zhuǎn)基因鼠是發(fā)生條件打靶的關(guān)鍵
三、條件基因打靶技術(shù)基本策略
第四節(jié) 基因打靶技術(shù)的改進(jìn)和應(yīng)用前景
一、重組工程系統(tǒng)使得構(gòu)建基因打靶載體更方便、快捷
二、位點特異性重組酶系統(tǒng)實現(xiàn)時空特異性基因敲除
三、大規(guī)模隨機基因敲除技術(shù)
四、miRNA敲除小鼠證實miRNA在哺乳動物中的生理功能
五、顯微注射技術(shù)的改良
六、基因打靶的應(yīng)用前景
參考文獻(xiàn)
第六章 轉(zhuǎn)基因及其表達(dá)的檢測
第一節(jié) 外源基因整合的檢測
一、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)
二、Southern印跡雜交法
三、DNA斑點雜交
四、染色體原位雜交
五、原位聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(in situ PCR)
第二節(jié) 外源基因在轉(zhuǎn)錄水平的檢測
一、反轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)
二、Northern印跡雜交法
三、RNA斑點雜交
四、RNA原位雜交
五、原位反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)
六、RNase保護(hù)分析
七、反轉(zhuǎn)錄差異顯示技術(shù)
第三節(jié) 外源基因在翻譯水平的鑒定
一、酶聯(lián)免疫吸附劑測定
二、Western印跡法
三、免疫組織化學(xué)染色法
四、報告基因
五、雙向電泳
參考文獻(xiàn)
第七章 轉(zhuǎn)基因動物技術(shù)在生物及醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用
第一節(jié) 轉(zhuǎn)基因動物技術(shù)在研究哺乳動物發(fā)育中的應(yīng)用
一、轉(zhuǎn)錄因子與發(fā)育紊亂
二、轉(zhuǎn)錄因子與心臟發(fā)育
第二節(jié) 轉(zhuǎn)基因動物技術(shù)在基因表達(dá)調(diào)控研究中的應(yīng)用_
一、利用轉(zhuǎn)基因動物可研究基因在發(fā)育中的時空調(diào)控
二、轉(zhuǎn)基因動物技術(shù)可探討目的基因突變所致的異常表型以研究基因功能
第三節(jié) 轉(zhuǎn)基因動物技術(shù)在醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用
一、在腫瘤學(xué)研究中應(yīng)用
二、在免疫學(xué)研究中的應(yīng)用
三、在遺傳性疾病研究中的應(yīng)用_
四、在病毒性疾病研究中的應(yīng)用
五、在改良和培育動物新品種的應(yīng)用
六、在生物活性物質(zhì)研制生產(chǎn)中的應(yīng)用
第四節(jié) 人類疾病的轉(zhuǎn)基因動物模型
一、神經(jīng)系統(tǒng)疾病的轉(zhuǎn)基因動物模型
二、聽覺和視覺疾病的轉(zhuǎn)基因小鼠模型
三、心血管疾病的轉(zhuǎn)基因動物模型
四、骨、軟骨疾病的轉(zhuǎn)基因小鼠模型
五、癌癥的轉(zhuǎn)基因小鼠模型
六、代謝和激素疾病的轉(zhuǎn)基因小鼠模型
七、病毒性疾病轉(zhuǎn)基因小鼠模型
八、其他疾病的轉(zhuǎn)基因動物模型
……
第八章 轉(zhuǎn)基因動物技術(shù)在生物制藥中的應(yīng)用
第九章 轉(zhuǎn)基因動物技術(shù)在異種器官移植中的應(yīng)用
第十章 轉(zhuǎn)基因技術(shù)的安全與倫理問題
參考文獻(xiàn)