玉米品種DNA指紋鑒定技術(shù)研究與應(yīng)用

第一章 玉米種子質(zhì)量鑒定技術(shù)的發(fā)展
第一節(jié) 玉米種子質(zhì)量及種子質(zhì)量檢測(cè)的重要性
第二節(jié) 主要的種子鑒定技術(shù)
一、常規(guī)鑒定技術(shù)
二、現(xiàn)代鑒定技術(shù)
第三節(jié) 分子技術(shù)在玉米品種鑒定中的發(fā)展趨勢(shì)
一、從RAPD標(biāo)記到SSR標(biāo)記的技術(shù)提升
二、從SSR標(biāo)記到SNP標(biāo)記的技術(shù)探索
三、從非功能標(biāo)記向功能標(biāo)記的轉(zhuǎn)變
第二章 玉米品種DNA指紋鑒定標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)體系的建立
第一節(jié) DNA提取方法的研究
一、DNA提取的基本方法及原理
二、DNA快速提取方法研究——堿煮法
三、高質(zhì)量DNA提取方法研究——改良高鹽低pH法
四、果皮組織DNA提取方法研究
第二節(jié) PcR擴(kuò)增反應(yīng)程序和反應(yīng)體系的研究
一、通用PCR擴(kuò)增反應(yīng)程序的建立
二、多重PCR擴(kuò)增體系的建立
第三節(jié) 電泳檢測(cè)方法的研究
一、主要電泳檢測(cè)方法的比較
二、PAGE／快速銀染檢測(cè)法的研究
三、毛細(xì)管電泳多色熒光檢測(cè)與變性PAGE電泳銀染檢測(cè)兩種檢測(cè)方法的比較
四、毛細(xì)管電泳熒光檢測(cè)中的異常電泳類(lèi)型及原因分析
第三章 核心引物的篩選確定及復(fù)合擴(kuò)增體系的建立
第一節(jié) 玉米DNA指紋鑒定中核心引物組合法的確立
一、特征譜帶法、引物組合法和核心引物組合法的概念
二、特征譜帶法、引物組合法和核心引物組合法的比較研究
第二節(jié) 玉米通用SSR核心引物篩選及高通量多重PCR復(fù)合擴(kuò)增體系建立
一、研究目的
二、研究思路
三、核心引物的篩選
四、核心引物的重新設(shè)計(jì)
五、熒光多重PCR組合的建立
第四章 玉米DNA指紋庫(kù)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)及建庫(kù)標(biāo)準(zhǔn)化規(guī)范
第一節(jié) DNA指紋庫(kù)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)
一、建庫(kù)SSR引物基本信息
二、原始數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)記錄方式
三、原始數(shù)據(jù)導(dǎo)入數(shù)據(jù)庫(kù)的方式
第二節(jié) 玉米DNA指紋數(shù)據(jù)庫(kù)建庫(kù)標(biāo)準(zhǔn)化規(guī)范的建立
一、標(biāo)記方法及標(biāo)記來(lái)源
二、檢測(cè)平臺(tái)
三、試劑質(zhì)量保證
四、樣品的來(lái)源及性質(zhì)
五、引物及流程的評(píng)估
六、不同來(lái)源數(shù)據(jù)的有效整合
七、構(gòu)建品種DNA指紋模式庫(kù)
八、構(gòu)建品種DNA指紋擴(kuò)展庫(kù)
九、數(shù)據(jù)庫(kù)數(shù)據(jù)的隨機(jī)盲測(cè)
第五章 玉米DNA指紋數(shù)據(jù)庫(kù)管理系統(tǒng)的建立
第一節(jié) 數(shù)據(jù)信息表的整理
一、信息類(lèi)資料
二、數(shù)據(jù)類(lèi)資料
三、圖片類(lèi)資料
第二節(jié) 分析功能的設(shè)計(jì)及實(shí)現(xiàn)
一、主要功能及定義
二、品種查詢(xún)比較功能的設(shè)計(jì)
三、親子鑒定功能的設(shè)計(jì)
四、品種指紋圖譜繪制功能的設(shè)計(jì)
五、一致性鑒定功能的設(shè)計(jì)
六、純度鑒定功能的設(shè)計(jì)
第三節(jié) 網(wǎng)站用戶權(quán)限分類(lèi)及設(shè)計(jì)
第四節(jié) 未來(lái)發(fā)展戰(zhàn)略規(guī)劃
一、建立玉米DNA指紋國(guó)際聯(lián)合數(shù)據(jù)庫(kù)及管理系統(tǒng)
二、建立DNA指紋數(shù)據(jù)庫(kù)、分子標(biāo)記輔助育種、單倍體育種技術(shù)三位一體的高效玉米育種技術(shù)體系
第六章 DNA指紋技術(shù)在玉米品種純度、一致性、特異性鑒定中的研究及應(yīng)用
第一節(jié) DNA指紋技術(shù)在玉米品種純度鑒定中的應(yīng)用研究
一、玉米雜交種純度鑒定核心引物的選擇標(biāo)準(zhǔn)
二、特定品種純度鑒定特異引物選擇標(biāo)準(zhǔn)
三、雙親互補(bǔ)帶型——適于玉米雜交種純度鑒定的譜帶類(lèi)型
四、玉米雜交種純度鑒定具體工作流程
第二節(jié) DNA指紋技術(shù)在玉米品種一致性鑒定中的應(yīng)用研究
一、一致性檢測(cè)中異型帶的類(lèi)型
二、不同品種、不同位點(diǎn)一致性分布特征
三、一致性檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)的制定
四、造成品種一致性差的原因分析
第三節(jié) DNA指紋技術(shù)在玉米品種特異性鑒定中的應(yīng)用研究
一、現(xiàn)行的形態(tài)DUS測(cè)試系統(tǒng)面臨的問(wèn)題
二、分子技術(shù)在玉米特異性測(cè)試中的應(yīng)用策略
三、分子測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)的制定
四、需探討的幾個(gè)問(wèn)題
第四節(jié) DNA指紋技術(shù)在玉米品種區(qū)域試驗(yàn)中的應(yīng)用
一、我國(guó)玉米區(qū)域試驗(yàn)品種DNA指紋檢測(cè)工作歷程
二、玉米區(qū)域試驗(yàn)品種DNA指紋檢測(cè)工作特點(diǎn)
三、DNA指紋監(jiān)控工作值得思考的幾個(gè)問(wèn)題
四、玉米區(qū)試DNA指紋檢測(cè)工作的意義
五、關(guān)于加強(qiáng)品種市場(chǎng)管理的對(duì)策建議
第七章 玉米品種實(shí)驗(yàn)室鑒定技術(shù)具體操作程序
第一節(jié) 玉米SSR標(biāo)記鑒定技術(shù)
一、DNA提取
二、PCR擴(kuò)增
三、電泳檢測(cè)
第二節(jié) 玉米種子清蛋白聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定技術(shù)
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br /> 二、儀器設(shè)備與試劑
三、溶液配制
四、電泳操作技術(shù)
第三節(jié) 玉米種子酯酶同工酶等電聚焦電泳
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br /> 二、儀器設(shè)備與試劑
三、溶液配制
四、電泳操作技術(shù)
附錄 法規(guī)文件匯編
國(guó)家玉米品種試驗(yàn)DNA指紋鑒定管理辦法
玉米品種鑒定DNA指紋方法（NY／T1432—2007）
國(guó)家區(qū)試玉米品種一致性及真實(shí)性DNA指紋檢測(cè)技術(shù)
農(nóng)作物種子質(zhì)量監(jiān)督抽查管理辦法
最高人民法院關(guān)于審理侵犯植物新品種權(quán)糾紛案件具體應(yīng)用法律問(wèn)題的若干規(guī)定
農(nóng)業(yè)植物新品種權(quán)侵權(quán)案件處理規(guī)定
北京市高級(jí)人民法院關(guān)于印發(fā)《北京市高級(jí)人民法院關(guān)于知識(shí)產(chǎn)權(quán)司法鑒定若干問(wèn)題的規(guī)定（試行）》的通知
農(nóng)作物種子質(zhì)量糾紛田間現(xiàn)場(chǎng)鑒定辦法
北京市種子管理站行政處罰條例
DNA指紋圖譜測(cè)試指南：分子標(biāo)記選擇和數(shù)據(jù)庫(kù)構(gòu)建（概要）
中華人民共和國(guó)種子法
農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全管理?xiàng)l例
中華人民共和國(guó)植物新品種保護(hù)條例實(shí)施細(xì)則（農(nóng)業(yè)部分）
主要農(nóng)作物品種審定辦法
農(nóng)業(yè)植物品種命名規(guī)定
主要參考文獻(xiàn)