細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)

第一篇 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)第一章 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)概述 第一節(jié) 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的基本概念及其優(yōu)缺點(diǎn) 一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的概念 二、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)缺點(diǎn) 第二節(jié) 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)發(fā)展史 一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的創(chuàng)立 二、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的發(fā)展 第三節(jié) 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用 一、在生物學(xué)領(lǐng)域的基礎(chǔ)研究中的應(yīng)用 二、在臨床醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用 三、在動(dòng)物育種上的應(yīng)用 四、在生物制品生產(chǎn)上的應(yīng)用 第四節(jié) 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)工作的基本要求和工作方法 一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)工作的基本要求 二、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)工作方法 [理論難點(diǎn)自測(cè)] 實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)項(xiàng)目 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的無菌操作第二章 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的基本知識(shí) 第一節(jié) 培養(yǎng)細(xì)胞的細(xì)胞生物學(xué) 一、培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)類型和形態(tài)特征 二、培養(yǎng)細(xì)胞分化狀態(tài)的變化 三、培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)特點(diǎn) 四、培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖過程 第二節(jié) 培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)條件 一、營(yíng)養(yǎng)需要 二、生存環(huán)境 第三節(jié) 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室 一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的設(shè)置 二、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的設(shè)備 三、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室常用器具 [理論難點(diǎn)自測(cè)] 實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)項(xiàng)目 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)常用設(shè)備的使用第三章 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的準(zhǔn)備工作 第一節(jié) 培養(yǎng)用品的清洗、包裝和滅菌 一、培養(yǎng)用品的清洗 二、培養(yǎng)用品的包裝 三、培養(yǎng)用品的消毒滅菌 第二節(jié) 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)用液的類型、配制和無菌處理 一、平衡鹽溶液 二、消化液 三、天然培養(yǎng)基 四、合成培養(yǎng)基 五、完全培養(yǎng)基 六、無血清培養(yǎng)基 七、其他常用液 [理論難點(diǎn)自測(cè)] 實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)項(xiàng)目一 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)器具的清洗、包裝和滅菌 實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)項(xiàng)目二 幾種動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)用液的配制和無菌處理第四章 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的基本技術(shù)和方法 第一節(jié) 培養(yǎng)細(xì)胞的取材與分離 一、培養(yǎng)細(xì)胞的取材 二、組織材料的分離 第二節(jié) 動(dòng)物細(xì)胞的原代培養(yǎng)技術(shù) 一、組織塊培養(yǎng)法 二、消化培養(yǎng)法 第三節(jié) 培養(yǎng)細(xì)胞的觀察和檢測(cè)技術(shù) 一、培養(yǎng)細(xì)胞的常規(guī)觀察 二、細(xì)胞生長(zhǎng)曲線的測(cè)定 三、細(xì)胞培養(yǎng)的污染檢測(cè)及其排除 第四節(jié) 動(dòng)物細(xì)胞傳代培養(yǎng)技術(shù) 一、原代培養(yǎng)的首次傳代 二、細(xì)胞傳代方法 三、細(xì)胞系的維持 第五節(jié) 細(xì)胞的凍存、復(fù)蘇和運(yùn)輸技術(shù) 一、細(xì)胞的凍存 二、細(xì)胞的復(fù)蘇 三、細(xì)胞的運(yùn)輸 [理論難點(diǎn)自測(cè)] 實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)項(xiàng)目一 細(xì)胞計(jì)數(shù)及密度換算 實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)項(xiàng)目二 小鼠胎兒細(xì)胞的原代培養(yǎng)(組織塊培養(yǎng)法) 實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)項(xiàng)目三 雞胚原代細(xì)胞的培養(yǎng)(消化培養(yǎng)法) 實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)項(xiàng)目四 培養(yǎng)細(xì)胞的觀察 實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)項(xiàng)目五 細(xì)胞活性檢查 實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)項(xiàng)目六 原代培養(yǎng)細(xì)胞的傳代 實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)項(xiàng)目七 細(xì)胞凍存技術(shù) 實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)項(xiàng)目八 細(xì)胞的常規(guī)復(fù)蘇技術(shù)第五章 動(dòng)物細(xì)胞的大規(guī)模培養(yǎng) 第一節(jié) 動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)概述 一、動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)的概念 二、動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用 三、動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)的一般工藝流程 第二節(jié) 動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)的方法和操作方式 一、動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)的方法 二、大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)的操作方式 第三節(jié) 動(dòng)物細(xì)胞生物反應(yīng)器 一、攪拌罐式生物反應(yīng)器 二、氣升式生物反應(yīng)器 三、中空纖維生物反應(yīng)器 四、其他生物反應(yīng)器 [理論難點(diǎn)自測(cè)] 實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)項(xiàng)目一 Vero細(xì)胞的微載體培養(yǎng) 實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)項(xiàng)目二 動(dòng)物細(xì)胞生物反應(yīng)器的使用或參觀第六章 特殊細(xì)胞培養(yǎng)概要 第一節(jié) 正常組織細(xì)胞的培養(yǎng) 一、上皮細(xì)胞培養(yǎng) 二、神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng) 第二節(jié) 腫瘤細(xì)胞培養(yǎng) 一、體外培養(yǎng)腫瘤細(xì)胞的生物學(xué)特性 二、腫瘤細(xì)胞的培養(yǎng)要點(diǎn) [理論難點(diǎn)自測(cè)] 實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)項(xiàng)目一 異體動(dòng)物接種成瘤實(shí)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)項(xiàng)目二 腫瘤細(xì)胞的軟瓊脂集落實(shí)驗(yàn)第七章 與動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)的部分實(shí)驗(yàn)技術(shù) 第一節(jié) 單克隆抗體的制備 一、單克隆抗體的概念 二、雜交瘤技術(shù)制備單克隆抗體的基本原理 三、雜交瘤技術(shù)制備單克隆抗體的主要過程 四、制備單克隆抗體可能出現(xiàn)的主要問題 第二節(jié) 細(xì)胞的基因轉(zhuǎn)染技術(shù) 一、待轉(zhuǎn)染細(xì)胞的準(zhǔn)備 二、常用的細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法 [理論難點(diǎn)自測(cè)] 實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)項(xiàng)目一 細(xì)胞融合 實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)項(xiàng)目二 細(xì)胞克隆第二篇 植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)第八章 植物細(xì)胞培養(yǎng)概論 第一節(jié) 植物組織與細(xì)胞培養(yǎng) 一、植物組織培養(yǎng) 二、植物細(xì)胞培養(yǎng) 第二節(jié) 植物細(xì)胞培養(yǎng)的發(fā)展史 一、植物細(xì)胞培養(yǎng)的創(chuàng)立階段 二、植物細(xì)胞培養(yǎng)的發(fā)展階段 三、植物細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用研究階段 第三節(jié) 植物細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用 一、在植物育種方面的應(yīng)用 二、在植物脫毒方面的應(yīng)用 三、在離體快繁方面的應(yīng)用 四、在植物種質(zhì)資源保存方面的應(yīng)用 [理論難點(diǎn)自測(cè)] 實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)項(xiàng)目 植物細(xì)胞培養(yǎng)無菌操作訓(xùn)練第九章 植物細(xì)胞培養(yǎng)的條件 第一節(jié) 植物細(xì)胞培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)室條件 一、植物細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的設(shè)計(jì) 二、植物細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的儀器和設(shè)備 三、植物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)器具 第二節(jié) 植物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基 一、培養(yǎng)基的組成 二、常用的植物細(xì)胞培養(yǎng)基種類 三、植物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基配制 第三節(jié) 植物細(xì)胞培養(yǎng)的環(huán)境條件 一、溫度 二、濕度 三、光照 四、氣體 五、pH [理論難點(diǎn)自測(cè)] 實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)項(xiàng)目一 植物組織細(xì)胞培養(yǎng)基母液的配制和保存 實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)項(xiàng)目二 植物組織細(xì)胞培養(yǎng)基的配制和滅菌 實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)項(xiàng)目三 植物細(xì)胞培養(yǎng)常用設(shè)備的使用第十章 植物細(xì)胞培養(yǎng)的基本過程和方法 第一節(jié) 植物細(xì)胞的獲取 一、從外植體直接分離植物細(xì)胞 二、通過愈傷組織誘導(dǎo)獲取植物細(xì)胞” 第二節(jié) 植物細(xì)胞的懸浮培養(yǎng) 一、懸浮細(xì)胞的誘導(dǎo) 二、懸浮培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)和測(cè)定 三、懸浮培養(yǎng)細(xì)胞的同步化 第三節(jié) 植物細(xì)胞的固定化培養(yǎng) 一、植物細(xì)胞固定化的方法 二、固定化植物細(xì)胞的培養(yǎng)方法 第四節(jié) 單細(xì)胞培養(yǎng) 一、植物單細(xì)胞的制備 二、植物單細(xì)胞的培養(yǎng) 三、影響植物單細(xì)胞培養(yǎng)的因素 第五節(jié) 原生質(zhì)體培養(yǎng) 一、植物原生質(zhì)體的特點(diǎn) 二、植物原生質(zhì)體的制備 三、植物原生質(zhì)體的培養(yǎng)方法 [理論難點(diǎn)自測(cè)] 實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)項(xiàng)目一 胡蘿卜和白菜成熟胚愈傷組織培養(yǎng) 實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)項(xiàng)目二 植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)第十一章 植物細(xì)胞的大規(guī)模培養(yǎng) 第一節(jié) 植物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)概述 一、植物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)的概念 二、植物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)的應(yīng)用和工業(yè)前景 三、植物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)流程 第二節(jié) 植物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù) 一、植物細(xì)胞規(guī)?；囵B(yǎng)體系的建立 二、植物細(xì)胞的大規(guī)模培養(yǎng)方法 第三節(jié) 植物細(xì)胞生物反應(yīng)器 一、攪拌式生物反應(yīng)器 二、非攪拌式生物反應(yīng)器 三、植物細(xì)胞固定化培養(yǎng)生物反應(yīng)器 [理論難點(diǎn)自測(cè)] 實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)項(xiàng)目 種子細(xì)胞篩選與細(xì)胞規(guī)?；囵B(yǎng)附錄 細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)常用術(shù)語(yǔ)中英文對(duì)照參考文獻(xiàn)