微生物檢測驗證技術

第一章 緒論
　一、驗證的概念與內涵
　二、驗證的類型
　三、藥品微生物檢測驗證的特點與影響因素
　　（一）微生物學檢測對象的特點
　?。ǘ┪⑸飳W檢測的特點
　?。ㄈ┪⑸飳W檢測的影響因素
　四、藥品微生物檢測驗證技術的內容
第二章 微生物檢測實驗室的設施與設備驗證
　一、實驗室設施與驗證
　?。ㄒ唬?潔凈室（無菌室）
　　（二）毒菌種處理和微生物鑒別局部100級控制室
　?。ㄈ┛股匚⑸餀z定、細菌內毒素檢查、抑菌實驗的半無菌室
　　（四）其他室（培養(yǎng)室，試液及培養(yǎng)基的配制室或滅菌室，器皿洗滌、烘干室，實驗室，辦公休息室）
　二、實驗室設備與驗證
　?。ㄒ唬﹥x器設備的管理原則
　　（二）實驗室設備的質量保證和管理要求
　?。ㄈ┏瑑艄ぷ髋_的監(jiān)控規(guī)程與使用指南
　三、實驗室操作所用玻璃器具（容器）的校正（驗證）
　?。ㄒ唬┤萘科咳莘e的校正
　?。ǘ┮埔汗埽潭裙埽┤莘e的校正
　　（三）滴定管容積的校正
　?。ㄋ模┬Ｕ萘績x器時的注意事項
　?。ㄎ澹┏Ｒ娙萘績x器的容量允差
　　（六）微量加樣器的校驗
第三章 微生物檢測用標準物質的使用及管理
　一、概述　
　?。ㄒ唬藴势坊驅φ掌返膩碓?br />　?。ǘ藴势坊驅φ掌返谋９?br />　?。ㄈ藴势坊驅φ掌返拇鎯皖I用
　?。ㄋ模藴势坊驅φ掌返匿N毀及使用記錄
　?。ㄎ澹┒ㄆ趯藴势坊驅φ掌愤M行抽樣檢查
　?。┨厥獾臉藴势贰N
　二、抗生素標準品
　　（—）使用與保存
　?。ǘ┬r復核
　　（三）效價復核數(shù)據(jù)的統(tǒng)計學分析實例
　?。ㄋ模┬r復核數(shù)據(jù)的計算機統(tǒng)計處理
　三、微生物菌種的使用、保存與管理、驗證
　　（一）制定菌種使用、保藏管理程序
　　（二）嚴格控制菌種的傳代、做好保藏工作
　?。ㄈ┏Ｓ镁N保藏方法
　　（四）菌種保藏標簽的規(guī)范與要求
　?。ㄎ澹﹪栏窬N的質量控制，確保菌種的質量
　?。┚N處理的注意事項與有關記錄
　四、細菌內毒素標準品與鱟試劑
　?。ㄒ唬┘毦鷥榷舅貒覙藴势泛凸ぷ鳂藴势?br />　?。ǘ┘毦鷥榷舅仳炞C品
　?。ㄈ┠z鱟試劑靈敏度復核
　　（四）光度法標準曲線的可靠性試驗
第四章 消毒劑的使用及效力驗證
　一、 消毒劑與滅菌劑的劃分
　　（一）衛(wèi)生處理與衛(wèi)生洗滌劑
　?。ǘ┫九c消毒劑
　?。ㄈ缇c滅菌劑
　二、微生物對消毒因子的敏感性
　三、消毒劑的效力等級與消毒效力評價
　四、影響消毒劑效力的主要因素
　?。ㄒ唬﹑H
　　（二）溫度
　?。ㄈ┯袡C物
　?。ㄋ模┍砻婊钚詣┖徒饘匐x子
　?。ㄎ澹┧?br />　五、消毒劑的作用方式
　?。ㄒ唬┦沟鞍踪|變性、凝固
　　（二）破壞或損傷細胞膜
　?。ㄈ┳钄嗍澄飻z取和廢物排泄
　　（四）鈍化關鍵酶的活性
　六、細菌對消毒劑的耐受性
　?。ㄒ唬┚吣褪苄缘募毦筒荒芡耆滤赖南緞﹦┝?br />　?。ǘ┓置诙嗑厶菢游镔|黏附細菌，共同形成生物膜
　?。ㄈ?清潔劑之間的交互作用鈍化消毒劑效力
　七、消毒劑的選擇和交替使用
　八、制藥工業(yè)常用的消毒劑
　　（一）醇類
　?。ǘ┓宇惢衔?br />　?。ㄈ┘句@鹽類化合物
　　（四）液體滅菌劑和殺芽孢劑
　九、消毒劑的效力確認
　　（一）確認時需要考慮的因素
　?。ǘ┈F(xiàn)場考察
　　（三）實驗室考察
　　（四）定量懸浮試驗
　?。ㄎ澹┹d體浸泡定量試驗
　十、消毒劑稀釋液的效期確認
　十一、培訓和安全教育
　十二、消毒劑消毒效果驗證實驗（定量懸浮試驗）實例
　?。ㄒ唬炞C原理
　　（二）驗證材料
　?。ㄈ炞C方法（定量懸浮試驗）
第五章 培養(yǎng)基、緩沖液、稀釋劑、淋洗液和試劑的驗證
　一、培養(yǎng)基的概念與分類
　二、培養(yǎng)基的制備、融化程序的確認及注意事項
　　（一）培養(yǎng)基的制備
　?。ǘ┡囵B(yǎng)基融化程序的確認
　　（三）培養(yǎng)基制備應注意事項
　三、培養(yǎng)基的儲存
　四、培養(yǎng)基的質量控制
　?。ㄒ唬┩庥^檢查
　?。ǘ﹑H檢查
　　（三）培養(yǎng)基的無菌性檢查
　?。ㄋ模┡囵B(yǎng)基的靈敏度檢查（促菌生長性）
　五、染色液與各種生化反應試液的驗證
　六、緩沖液、稀釋液與淋洗液
　?。ㄒ唬o菌檢查用稀釋液、淋洗液及其制備方法
　　（二）微生物限度檢查用稀釋劑及其制備方法
　七、文件管理與標簽
　八、有效期的確認
　九、培養(yǎng)基靈敏度的驗證試驗實例
　?。ㄒ唬o菌檢查培養(yǎng)基靈敏度的驗證試驗實例
　?。ǘ┪⑸锵薅葯z查培養(yǎng)基靈敏度的驗證試驗實例
附一 無菌檢查用培養(yǎng)基及其制備方法
　附二 微生物限度檢測用培養(yǎng)基及其制備方法
　附三 微生物限度檢測用試藥、試液與指示液
　附四 抗生素效價測定用培養(yǎng)基及滅菌緩沖液的制備方法
　附五 微生物檢測用生化試驗培養(yǎng)基及試劑的制備方法
　附六 微生物檢測用試液、指示液、染色液的配制及染色法
第六章 滅菌法
　一、滅菌方法
　　（一）濕熱滅菌法
　?。ǘ└蔁釡缇?br />　?。ㄈ┹椛錅缇?br />　?。ㄋ模怏w滅菌法
　?。ㄎ澹┻^濾除菌法
　　（六）無菌生產(chǎn)工藝
　二、生物指示劑
　　（一）制備生物指示劑用微生物的基本要求
　?。ǘ┥镏甘緞┑闹苽?br />　　（三）生物指示劑的應用
　?。ㄋ模┏Ｓ蒙镏甘緞?br />　三、濕熱滅菌法驗證試驗實例
　?。ㄒ唬┊a(chǎn)芽孢梭菌芽孢-生物指示劑驗證乳劑類產(chǎn)品的滅菌工藝實例
　　（二）生物指示劑驗證實例
　?。ㄈ┏Ｓ孟緶缇Чu價實驗操作實例
第七章 藥品微生物檢驗方法的驗證
　一、確保藥品微生物檢測方法驗證準確性的關鍵因素
　?。ㄒ唬炞C實驗用微生物的種類及其生理特性
　?。ǘ炞C用微生物接種液的制備
　　（三）驗證試驗條件
　二、驗證試驗的原理與方法
　?。ㄒ唬◎炞C的原理
　　（二）驗證的合格標準
　?。ㄈ┧幤窡o菌檢查方法的驗證
　　（四）藥品細菌、霉菌及酵母菌計數(shù)檢查方法的驗證
　?。ㄎ澹┧帣z控制菌檢查法的驗證
　?。┧帣z中各控制菌檢測的注意事項
　三、驗證實驗結果的評價與報告
　四、驗證實驗實例
　　實例（一）氟喹諾酮類藥物的無菌檢查方法驗證
　　實例（二）××注射液的無菌檢查（薄膜過濾法）方法的驗證方案示例
　　實例（三）微生物限度檢查方法（平皿菌落計數(shù)法）的驗證方案示例
　　實例（四）大腸埃希菌檢查方法的驗證方案示例
第八章 微生物檢測數(shù)據(jù)的趨勢分析和統(tǒng)計處理
　一、檢測數(shù)據(jù)的趨勢分析
　?。ㄒ唬z測數(shù)據(jù)趨勢分析的目的
　　（二）微生物檢測進行趨勢分析的常規(guī)項目
　?。ㄈ┶厔莘治龅囊饬x
　二、微生物檢測數(shù)據(jù)的統(tǒng)計處理
　?。ㄒ唬┙y(tǒng)計學常用的變異指標數(shù)值
　　（二）正態(tài)（常態(tài)）分布（曲線）
　?。ㄈ﹖檢驗與t分布
　　（四）F檢驗（方差分析）
　?。ㄎ澹│郑ㄗx作卡方）分析
　三、制備趨勢分析圖進行分析
　四、微生物檢測數(shù)據(jù)的統(tǒng)計處理
　　（一）特異反應檢測值的剔除
　?。ǘ﹖檢驗實例
　　（三）F檢驗實例
　?。ㄋ模│謾z驗實例
　?。ㄎ澹┰囼灲Y果的合并計算
　五、統(tǒng)計例題的微機運算
　?。ㄒ唬┡鋵υ囼瀟檢驗微機運算
　?。ǘ┒嘁蛩谾檢驗微機運算
　　（三）配對試驗χ（卡方）檢驗
　?。ㄋ模┝糠磻叫芯€測定隨機區(qū)組設計（3.3）法的微機運算
　?。ㄎ澹┏Ｒ?guī)檢定中的合并計算微機運算
　六、微生物檢測數(shù)據(jù)分析應注意的問題
第九章 有關微生物檢測（查）的操作方法
　一、抗生素微生物檢定
　　（一）管碟法
　?。ǘ岫确?br />　二、細菌內毒素檢查
　?。ㄒ唬┠z法操作
　?。ǘ┠z半定量試驗
　?。ㄈ┕舛葴y定法操作
　三、無菌檢查
　?。ㄒ唬┍∧み^濾法
　?。ǘ┲苯咏臃N法
　?。ㄈo菌檢查結果判斷
　四、微生物限度檢查
　?。ㄒ唬┕┰囈旱闹苽?br />　　（二）細菌、霉菌及酵母菌計數(shù)
　　（三）控制菌檢查
　?。ㄋ模┪⑸锵薅葯z查結果判斷
　　附（一）《中國藥典》（2005年版）（一部）微生物限度標準
　　附（二）《中國藥典》（2005年版）（二部）微生物限度標準
　五、鮮乳中抗生素殘留量檢驗
參考文獻